本方法适用范围是用于医药或兽医的油状维生素a(或维生素 ad3,),而且其含量至少应为500,000iu/克。
1 原理
将维生素a溶于2-丙醇中,然后用紫外分光光度汁在326m下测定
2 安全措施
防备挥发气体装 (通风橱)
3 试剂
适用于分光光度汁的2-内醇
4 仪器
常规实验室器皿
紫外,可见光分光光度汁,其波长精度至少达士o.2nm
5 步骤
注意:操作必须在没有光线直芭射或全部使用棕色玻璃器皿的条件下进行
5.1-制备溶液
高度精确地 (土0.01毫克)称取约含60,000iu维生素a油状物 (相当于含
量为2,500,000iu/克的维生素a丙酸醋25毫克,或含量为1,700,000/iu克的
维生素a棕榈酸醋35毫克)的样品。
将其溶解于2-丙醇中。用2-丙醇定容。旅荡摇匀形成匀质 (必须保证
样品彻底溶解)。
用取液器吸取2毫升溶液转移于100毫升容量瓶中。用2-丙醇定容至刻
度。彻底摇匀后做为待测溶液 (待测溶液维生素a含量应在10-15iu/
毫升)。
5.2-分光光度计测量
使用光径为1厘米的石英比色杯。用制备待测溶液的2-内醇校正光密度,
在300,326,350和370nm处测定待测溶液。
6 计算结果
变量:
-m:侍测样品的重量,单位为克
-v:总体积,单位为毫升 (按第5.1节配制肘应为100x50=5,000)
-a326:326nm处的光吸收
-a300:300nm的光吸收
-a350:350nm处的光吸收
-a370:370nm处的光吸收
若:
a300/a326<0.593
a350/a326<0.537
a370/a326<0.142
那么,每克样品中所含的维生素a的含量 (iu/克)应为:
a326 x v x1900
维生素a(iu/克) =
m x 100
等式中的1900是维生素a酯类物与国际单位的转换系数。
如果光吸收比值较上面提供的为大 (而且分光光度计波长的精确度没有
问题的话),那么该样品的维生素a含量则必须根据《欧洲药典》(eu-
ropen pharmacopoeia)中的b法来测定。
标准法规